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Kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae (MS)
【Paquete】50 kits/caja
【Indicación】El kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae es aplicable para detectar el ADN de Mycoplasma Synoviae en muestras respiratorias aviares, tejido pulmonar y otras muestras.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Componentes principales y contenido.】
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción doble MS | 900µl/Tubo | 1 |
Control positivo doble MS | 100µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Teoría】
Este kit se basa en la tecnología de PCR fluorescente en tiempo real. Selecciona el virus salvaje de Mycoplasma Synoviaes y la región conservada de la cepa vacunal MS-H como regiones diana de amplificación, diseña sondas de cebador específicas y marca diferentes grupos fluorescentes, y lleva a cabo análisis cualitativos. detección de Mycoplasma Synoviae a través de la amplificación del sistema de PCR fluorescente en tiempo real de un solo paso. Además de los cebadores específicos y las sondas fluorescentes, el sistema de reacción también está equipado con el tampón de PCR correspondiente, la enzima Taq.dNTP, Mg2+ y otros componentes, que pueden lograr una detección sensible y específica del ácido nucleico de MS, e identificar el virus salvaje y la cepa vacunal MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 u otros instrumentos de PCR cuantitativos fluorescentes.
【Requisito de muestra】
Muestras respiratorias y muestras pulmonares.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ADN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 18 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 2 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras de ácido nucleico en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
3. amplificación qR-T-PCR
3.1 Selección del canal de fluorescencia
Reporter Dye1: seleccione el canal FAM para detectar la cepa de vacuna MS-H, Quencher Dye: NINGUNO
Reporter Dye2: seleccione el canal VIC o HEX para detectar la cepa del virus salvaje de MS, Quencher Dye2: NINGUNO, referencia pasiva: NINGUNO.Consulte el manual del instrumento para otros instrumentos.
3.2 Las condiciones de reacción se establecen como:
Parámetros de amplificación | |||
Sistema | El volumen total es de 25 µl | ||
Condiciones de reacción de PCR | Fase | Condiciones | Ciclos |
Pre-desnaturalización | 95 ℃ durante 5 minutos | 1 | |
PCR | 95 ℃ durante 10 segundos |
40 | |
60 ℃ durante 30 segundos | |||
【Interpretación de los resultados】
1. Los siguientes requisitos deben cumplirse al mismo tiempo en un experimento; de lo contrario, el experimento no es válido y debe repetirse.
El control negativo no tenía curva de amplificación
La curva de amplificación del canal FAM de control positivo tuvo una fase de crecimiento logarítmico significativa, y el valor Ct de la curva de amplificación del canal FAM fue ≤ 32.
2. Si el canal FAM de la muestra de prueba no tiene una curva de amplificación, la muestra puede determinarse como IBDV negativa.Si el canal FAM tiene una curva de amplificación de fase de crecimiento logarítmica y el valor de Ct ≤ 36, se puede determinar como IBDV positivo.36 < valor Ct < 40 son muestras sospechosas, que deben volver a analizarse para su confirmación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae (MS)
【Paquete】50 kits/caja
【Indicación】El kit de detección de PCR en tiempo real para Mycoplasma Synoviae es aplicable para detectar el ADN de Mycoplasma Synoviae en muestras respiratorias aviares, tejido pulmonar y otras muestras.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Componentes principales y contenido.】
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción doble MS | 900µl/Tubo | 1 |
Control positivo doble MS | 100µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 100µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Teoría】
Este kit se basa en la tecnología de PCR fluorescente en tiempo real. Selecciona el virus salvaje de Mycoplasma Synoviaes y la región conservada de la cepa vacunal MS-H como regiones diana de amplificación, diseña sondas de cebador específicas y marca diferentes grupos fluorescentes, y lleva a cabo análisis cualitativos. detección de Mycoplasma Synoviae a través de la amplificación del sistema de PCR fluorescente en tiempo real de un solo paso. Además de los cebadores específicos y las sondas fluorescentes, el sistema de reacción también está equipado con el tampón de PCR correspondiente, la enzima Taq.dNTP, Mg2+ y otros componentes, que pueden lograr una detección sensible y específica del ácido nucleico de MS, e identificar el virus salvaje y la cepa vacunal MS-H.
【Instrumento】ABI 7500, ABI 7300, LightCycler480 u otros instrumentos de PCR cuantitativos fluorescentes.
【Requisito de muestra】
Muestras respiratorias y muestras pulmonares.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ADN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 18 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 2 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras de ácido nucleico en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
3. amplificación qR-T-PCR
3.1 Selección del canal de fluorescencia
Reporter Dye1: seleccione el canal FAM para detectar la cepa de vacuna MS-H, Quencher Dye: NINGUNO
Reporter Dye2: seleccione el canal VIC o HEX para detectar la cepa del virus salvaje de MS, Quencher Dye2: NINGUNO, referencia pasiva: NINGUNO.Consulte el manual del instrumento para otros instrumentos.
3.2 Las condiciones de reacción se establecen como:
Parámetros de amplificación | |||
Sistema | El volumen total es de 25 µl | ||
Condiciones de reacción de PCR | Fase | Condiciones | Ciclos |
Pre-desnaturalización | 95 ℃ durante 5 minutos | 1 | |
PCR | 95 ℃ durante 10 segundos |
40 | |
60 ℃ durante 30 segundos | |||
【Interpretación de los resultados】
1. Los siguientes requisitos deben cumplirse al mismo tiempo en un experimento; de lo contrario, el experimento no es válido y debe repetirse.
El control negativo no tenía curva de amplificación
La curva de amplificación del canal FAM de control positivo tuvo una fase de crecimiento logarítmico significativa, y el valor Ct de la curva de amplificación del canal FAM fue ≤ 32.
2. Si el canal FAM de la muestra de prueba no tiene una curva de amplificación, la muestra puede determinarse como IBDV negativa.Si el canal FAM tiene una curva de amplificación de fase de crecimiento logarítmica y el valor de Ct ≤ 36, se puede determinar como IBDV positivo.36 < valor Ct < 40 son muestras sospechosas, que deben volver a analizarse para su confirmación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
