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Kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Sonda de fluorescencia)
(Nombre del producto)Kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Sonda de fluorescencia)
(Paquete)50 kits/caja
(Indicación)El kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Fluorescence Probing) es aplicable para detectar el subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 en hisopos de faringe aviar, hisopos de cloaca, tejido, líquido alantoideo de embrión de pollo y cultivo celular.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
(Componentes principales y contenido.)
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción H5/H7-AVI | 1250µl/Tubo | 1 |
Control positivo H5/H7-AVI | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
(Almacenamiento y vida útil)
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
(Modelo)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros amplificadores PCR cuantitativos fluorescentes.
(Método de prueba)
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ARN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 25 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Subtipo de influenza aviar H5/H7 | Subtipo H5: el canal HEX recopila la señal de fluorescencia | |
Subtipo H7: el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos | 40 | |
56 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
(Interpretación de los resultados)
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo débil: valor Ct de los canales FAM y HEX ≤ 32, curva de amplificación con fase exponencial obvia.
(2) Control en blanco: los canales FAM y HEX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua, sin fase exponencial significativa y valor de Ct ≥ 38 o sin valor de Ct.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal |
Ácido nucleico positivo del subtipo H5 del virus de la influenza aviar | - | + |
Ácido nucleico positivo del subtipo H7 del virus de la influenza aviar | + | - |
Ácido nucleico positivo del subtipo H5/H7 del virus de la influenza aviar | + | + |
Ácido nucleico negativo del subtipo H5/H7 del virus de la influenza aviar | - | - |
*Nota: si hay una curva de amplificación de fase de crecimiento logarítmica y un valor de Ct ≤ 36, se considera +.Si no hay curva de amplificación o valor de Ct > 36, se juzga como -.Las muestras son sospechosas cuando 36 < valor Ct < 40, que debe volver a analizarse.
(Precauciones)
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
(Fabricar)
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Sonda de fluorescencia)
(Nombre del producto)Kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Sonda de fluorescencia)
(Paquete)50 kits/caja
(Indicación)El kit de detección del subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 (PCR-Fluorescence Probing) es aplicable para detectar el subtipo de ARN del virus de la influenza aviar H5/H7 en hisopos de faringe aviar, hisopos de cloaca, tejido, líquido alantoideo de embrión de pollo y cultivo celular.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
(Componentes principales y contenido.)
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción H5/H7-AVI | 1250µl/Tubo | 1 |
Control positivo H5/H7-AVI | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
(Almacenamiento y vida útil)
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
(Modelo)
ABI 7500, ABI QuantStudio 5, CFX Connect, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentiter 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros amplificadores PCR cuantitativos fluorescentes.
(Método de prueba)
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ARN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 25 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Subtipo de influenza aviar H5/H7 | Subtipo H5: el canal HEX recopila la señal de fluorescencia | |
Subtipo H7: el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos | 40 | |
56 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
(Interpretación de los resultados)
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo débil: valor Ct de los canales FAM y HEX ≤ 32, curva de amplificación con fase exponencial obvia.
(2) Control en blanco: los canales FAM y HEX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua, sin fase exponencial significativa y valor de Ct ≥ 38 o sin valor de Ct.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal |
Ácido nucleico positivo del subtipo H5 del virus de la influenza aviar | - | + |
Ácido nucleico positivo del subtipo H7 del virus de la influenza aviar | + | - |
Ácido nucleico positivo del subtipo H5/H7 del virus de la influenza aviar | + | + |
Ácido nucleico negativo del subtipo H5/H7 del virus de la influenza aviar | - | - |
*Nota: si hay una curva de amplificación de fase de crecimiento logarítmica y un valor de Ct ≤ 36, se considera +.Si no hay curva de amplificación o valor de Ct > 36, se juzga como -.Las muestras son sospechosas cuando 36 < valor Ct < 40, que debe volver a analizarse.
(Precauciones)
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
(Fabricar)
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810