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RgansoKit de detección de PCR a tiempo para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus porcino
[Nombre del producto] Kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus porcino
[Paquete] 50 pruebas
[Indicación] El kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus es aplicable para la detección, tipificación, diagnóstico auxiliar e investigación epidemiológica de PED/TGEV/PDCoV/RV en suero, plasma y tejido intestinal porcino. , contenido intestinal, ganglios linfáticos mesentéricos, excrementos y otras muestras.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
[Principales componentes y contenido]
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción PED/TGEV/PDCoV/RV | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo PED/TGEV/PDCoV/RV | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Almacenamiento y vida útil]
Almacenado a -20±5℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
[Modelo]
Para ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros termocicladores.
[Método de prueba]
1. Extracción de ácido nucleico
Se puede llevar a cabo un kit de extracción de ADN/ARN comercializado para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20µl a de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregar 5 µl ácido nucleico del control negativo, el control positivo y las muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el termociclador.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Señal de fluorescencia tetravalente PED/TGEV/PDCoV/RV | Gastroenteritis transmisible (TGEV): el canal HEX recopila la señal de fluorescencia | |
Diarrea epidémica porcina (PED): el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | |||
Virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino (PDCoV): el canal Cy5 recopila la señal de fluorescencia | |||
Rotavirus porcino (RV): el canal ROX recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
[Interpretación de los resultados]
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM, HEX, Cy5 y ROX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM, HEX, Cy5 y ROX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal | canal cy5 | canal ROX |
TGEV ácido positivo | - | + | - | - |
Ácido nucleico PED positivo | + | - | - | - |
Ácido nucleico de PDCoV positivo | - | - | + | - |
ácido nucleico RV positivo | - | - | - | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV y PED | + | + | - | - |
Ácido nucleico TGEV y PDCoV positivo | - | + | + | - |
Ácido nucleico PED y PDCoV positivo | + | - | + | - |
Ácido nucleico TGEV y RV positivo | - | + | - | + |
Ácido nucleico PED y RV positivo | + | - | - | + |
PDCoV y ácido nucleico de RV positivo | - | - | + | + |
Ácido nucleico TGEV, PED y RV positivo | + | + | - | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PDCoV y RV | + | - | + | + |
Ácido nucleico PED, PDCoV y RV positivo | - | + | + | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PED y PDCoV | + | + | + | - |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PED, PDCoV y RV | + | + | + | + |
Ácido nucleico negativo para TGEV, PED, PDCoV y RV | - | - | - | - |
*Nota:
Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se determina como '+'.
Si no hay curva de amplificación, se determina como '-'.
Si 36 < Valor Ct < 40, es un muestra dudosa, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
[Precauciones]
1. La gestión del laboratorio deberá seguir estrictamente las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.No se deben cruzar los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de reactivos y muestras.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
[Fabricar]
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
RgansoKit de detección de PCR a tiempo para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus porcino
[Nombre del producto] Kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus porcino
[Paquete] 50 pruebas
[Indicación] El kit de detección de PCR en tiempo real para diarrea epidémica porcina, gastroenteritis transmisible, virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino y rotavirus es aplicable para la detección, tipificación, diagnóstico auxiliar e investigación epidemiológica de PED/TGEV/PDCoV/RV en suero, plasma y tejido intestinal porcino. , contenido intestinal, ganglios linfáticos mesentéricos, excrementos y otras muestras.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
[Principales componentes y contenido]
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción PED/TGEV/PDCoV/RV | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo PED/TGEV/PDCoV/RV | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Almacenamiento y vida útil]
Almacenado a -20±5℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
[Modelo]
Para ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros termocicladores.
[Método de prueba]
1. Extracción de ácido nucleico
Se puede llevar a cabo un kit de extracción de ADN/ARN comercializado para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20µl a de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregar 5 µl ácido nucleico del control negativo, el control positivo y las muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el termociclador.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Señal de fluorescencia tetravalente PED/TGEV/PDCoV/RV | Gastroenteritis transmisible (TGEV): el canal HEX recopila la señal de fluorescencia | |
Diarrea epidémica porcina (PED): el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | |||
Virus de la enfermedad deltacoronavirus porcino (PDCoV): el canal Cy5 recopila la señal de fluorescencia | |||
Rotavirus porcino (RV): el canal ROX recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 55 ℃: 15 minutos | 1 | |
predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
[Interpretación de los resultados]
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM, HEX, Cy5 y ROX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM, HEX, Cy5 y ROX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal | canal cy5 | canal ROX |
TGEV ácido positivo | - | + | - | - |
Ácido nucleico PED positivo | + | - | - | - |
Ácido nucleico de PDCoV positivo | - | - | + | - |
ácido nucleico RV positivo | - | - | - | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV y PED | + | + | - | - |
Ácido nucleico TGEV y PDCoV positivo | - | + | + | - |
Ácido nucleico PED y PDCoV positivo | + | - | + | - |
Ácido nucleico TGEV y RV positivo | - | + | - | + |
Ácido nucleico PED y RV positivo | + | - | - | + |
PDCoV y ácido nucleico de RV positivo | - | - | + | + |
Ácido nucleico TGEV, PED y RV positivo | + | + | - | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PDCoV y RV | + | - | + | + |
Ácido nucleico PED, PDCoV y RV positivo | - | + | + | + |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PED y PDCoV | + | + | + | - |
Ácido nucleico positivo para TGEV, PED, PDCoV y RV | + | + | + | + |
Ácido nucleico negativo para TGEV, PED, PDCoV y RV | - | - | - | - |
*Nota:
Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se determina como '+'.
Si no hay curva de amplificación, se determina como '-'.
Si 36 < Valor Ct < 40, es un muestra dudosa, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
[Precauciones]
1. La gestión del laboratorio deberá seguir estrictamente las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.No se deben cruzar los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de reactivos y muestras.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
[Fabricar]
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810