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Kit de detección de PCR en tiempo real para Paratuberculosis Mycobacterium
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para Paratuberculosis Mycobacterium
【Paquete】50 pruebas
【Indicación】El kit de detección de PCR en tiempo real para Mycobacterium Paratuberculosis es aplicable para detectar el ARN de Mycobacterium Paratuberculosis en muestras de hisopos nasales, leche y líquido articular.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Componentes principales y contenido.】
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción de PMB | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo PMB | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ARN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. Amplificación por PCR (Ejemplo de ABI 7500, consulte esta operación y el manual para ABI 7300 y LC480).
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
3. amplificación qRT-PCR
3.1 Canal de señal de fluorescencia: el modo de detección de la sonda se establece como: Reporter Dye1: FAM y Quencher Dye:NONE.
3.2 Las condiciones de reacción se establecerán como:
Parámetros de amplificación | |||
Sistema | El volumen total es de 25 µl | ||
Condiciones de reacción de PCR | Fase | Condiciones | Ciclos |
Proceso UNG | 37 ℃ durante 2 minutos | 1 | |
Pre-desnaturalización | 95 ℃ durante 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ durante 10 segundos |
40 | |
60 ℃ durante 30 segundos Configúrelo para recoger la señal fluorescente en el final de esta fase | |||
【Interpretación de los resultados】
1. El juicio de validez:
1.1 Control positivo: El valor Ct del canal FAM ≤ 32, y la curva de amplificación tiene una fase de crecimiento exponencial significativa.
1.2 Control Negativo: El canal FAM no tiene curva de amplificación, o la curva de amplificación es una línea recta o una línea ligeramente oblicua.
2. El juicio del resultado de la prueba:
Si el canal de detección FAM de la muestra de prueba tiene sin curva de amplificación, se puede determinar como PMB negativo.
Si el canal de detección de FAM tiene una curva de amplificación de crecimiento exponencial y el valor de Ct es ≤ 36, se puede determinar como PMB positivo.
36 Las muestras deben ser consideradas como resultados dudosos, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detección de PCR en tiempo real para Paratuberculosis Mycobacterium
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para Paratuberculosis Mycobacterium
【Paquete】50 pruebas
【Indicación】El kit de detección de PCR en tiempo real para Mycobacterium Paratuberculosis es aplicable para detectar el ARN de Mycobacterium Paratuberculosis en muestras de hisopos nasales, leche y líquido articular.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Componentes principales y contenido.】
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción de PMB | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo PMB | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ARN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. Amplificación por PCR (Ejemplo de ABI 7500, consulte esta operación y el manual para ABI 7300 y LC480).
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción de PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el amplificador de PCR cuantitativo fluorescente.
3. amplificación qRT-PCR
3.1 Canal de señal de fluorescencia: el modo de detección de la sonda se establece como: Reporter Dye1: FAM y Quencher Dye:NONE.
3.2 Las condiciones de reacción se establecerán como:
Parámetros de amplificación | |||
Sistema | El volumen total es de 25 µl | ||
Condiciones de reacción de PCR | Fase | Condiciones | Ciclos |
Proceso UNG | 37 ℃ durante 2 minutos | 1 | |
Pre-desnaturalización | 95 ℃ durante 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃ durante 10 segundos |
40 | |
60 ℃ durante 30 segundos Configúrelo para recoger la señal fluorescente en el final de esta fase | |||
【Interpretación de los resultados】
1. El juicio de validez:
1.1 Control positivo: El valor Ct del canal FAM ≤ 32, y la curva de amplificación tiene una fase de crecimiento exponencial significativa.
1.2 Control Negativo: El canal FAM no tiene curva de amplificación, o la curva de amplificación es una línea recta o una línea ligeramente oblicua.
2. El juicio del resultado de la prueba:
Si el canal de detección FAM de la muestra de prueba tiene sin curva de amplificación, se puede determinar como PMB negativo.
Si el canal de detección de FAM tiene una curva de amplificación de crecimiento exponencial y el valor de Ct es ≤ 36, se puede determinar como PMB positivo.
36 Las muestras deben ser consideradas como resultados dudosos, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
