Estado de Disponibilidad: | |
---|---|
Rganso-time PCR Kit de Detección del Virus de la Peste Porcina Clásica, Síndrome Reproductivo y Respiratorio Porcino y Virus de la pseudorrabia
[Nombre del producto] Kit de Detección PCR en tiempo real para Virus de la Peste Porcina Clásica, Síndrome Reproductivo y Respiratorio Porcino y Virus de la Pseudorrabia.
[Paquete] 50 pruebas
[Indicación] El kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina clásica, el síndrome reproductivo y respiratorio porcino y el virus de la pseudorrabia es aplicable para detectar el ácido nucleico de CSFV/PRRSV/PRS en muestras de amígdalas, linfa, saliva, sangre y semen.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
[Principales componentes y contenido]
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo de CSFV/PRRSV/PRS | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Almacenamiento y vida útil]
Almacenado a -20±5℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
[Método de prueba]
1. Extracción de ácido nucleico
Se puede llevar a cabo un kit de extracción de ADN/ARN comercializado para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20µl a de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregar 5 µl ácido nucleico del control negativo, el control positivo y las muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el termociclador.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Virus de la peste porcina clásica (CSFV): el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | ||
Síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRS): el canal HEX/VIC recopila la señal de fluorescencia | |||
Virus de la pseudorrabia (PRV): el canal ROX recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 50 ℃: 5 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
[Interpretación de los resultados]
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM, HEX/VIC y ROX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM, HEX/VIC y ROX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | Canal HEX/VIC | canal ROX |
CSFV ácido positivo | + | - | - |
PRRSV ácido nucleico positivo | - | + | - |
PRV ácido nucleico positivo | - | - | + |
Ácido nucleico positivo para CSFV y PRRSV | + | + | - |
Ácido nucleico positivo para CSFV y PRV | + | - | + |
Ácido nucleico PRRSV y PRV positivo | - | + | + |
Ácido nucleico positivo para CSFV, PRRSV y PRV | + | + | + |
CSFV, PRRSV y PRV ácidos nucleicos negativos | - | - | - |
*Nota:
Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se determina como '+'.
Si no hay curva de amplificación, se determina como '-'.
Si 36 < Valor Ct < 40, es un muestra dudosa, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
[Precauciones]
1. La gestión del laboratorio deberá seguir estrictamente las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.No se deben cruzar los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de reactivos y muestras.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
[Fabricar]
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
Rganso-time PCR Kit de Detección del Virus de la Peste Porcina Clásica, Síndrome Reproductivo y Respiratorio Porcino y Virus de la pseudorrabia
[Nombre del producto] Kit de Detección PCR en tiempo real para Virus de la Peste Porcina Clásica, Síndrome Reproductivo y Respiratorio Porcino y Virus de la Pseudorrabia.
[Paquete] 50 pruebas
[Indicación] El kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina clásica, el síndrome reproductivo y respiratorio porcino y el virus de la pseudorrabia es aplicable para detectar el ácido nucleico de CSFV/PRRSV/PRS en muestras de amígdalas, linfa, saliva, sangre y semen.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
[Principales componentes y contenido]
Nombre | Especificación | Cantidad |
Solución de reacción CSFV/PRRSV/PRS | 1000µl/Tubo | 1 |
Control positivo de CSFV/PRRSV/PRS | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
[Almacenamiento y vida útil]
Almacenado a -20±5℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
[Método de prueba]
1. Extracción de ácido nucleico
Se puede llevar a cabo un kit de extracción de ADN/ARN comercializado para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20µl a de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregar 5 µl ácido nucleico del control negativo, el control positivo y las muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el termociclador.
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 30 µl | ||
Colección de señales | Virus de la peste porcina clásica (CSFV): el canal FAM recopila la señal de fluorescencia | ||
Síndrome reproductivo y respiratorio porcino (PRRS): el canal HEX/VIC recopila la señal de fluorescencia | |||
Virus de la pseudorrabia (PRV): el canal ROX recopila la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
Transcripción inversa | 50 ℃: 5 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
[Interpretación de los resultados]
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM, HEX/VIC y ROX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM, HEX/VIC y ROX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | Canal HEX/VIC | canal ROX |
CSFV ácido positivo | + | - | - |
PRRSV ácido nucleico positivo | - | + | - |
PRV ácido nucleico positivo | - | - | + |
Ácido nucleico positivo para CSFV y PRRSV | + | + | - |
Ácido nucleico positivo para CSFV y PRV | + | - | + |
Ácido nucleico PRRSV y PRV positivo | - | + | + |
Ácido nucleico positivo para CSFV, PRRSV y PRV | + | + | + |
CSFV, PRRSV y PRV ácidos nucleicos negativos | - | - | - |
*Nota:
Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se determina como '+'.
Si no hay curva de amplificación, se determina como '-'.
Si 36 < Valor Ct < 40, es un muestra dudosa, y el análisis debe repetirse para su confirmación.
[Precauciones]
1. La gestión del laboratorio deberá seguir estrictamente las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.No se deben cruzar los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de reactivos y muestras.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se tratarán con hipoclorito al 10% o alcohol al 75% o lámpara ultravioleta.
[Fabricar]
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810