Estado de Disponibilidad: | |
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Kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina africana (VP72/I177L)
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina africana (VP72/I177L)
【Paquete】50 kits/caja
【Indicación】El kit de detección del virus de la peste porcina africana es aplicable para detectar el ADN del subtipo VP72/I177L del virus de la peste porcina africana en saliva, sangre, tejido y muestras ambientales de cerdo.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Principales componentes y contenido】
Nombre | Especificación | Cantidad |
1000µl/Tubo | 1 | |
Control positivo del virus de la peste porcina africana (VP72/I177L) | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Solicitud】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros instrumentos de PCR en tiempo real.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ADN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el PCR en tiempo real...
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 25 µl | ||
Colección de señales | ASFV (VP72/I177L) Señal fluorescente | I177L-HEXchannel recoge la señal de fluorescencia | |
El canal VP72-FAM recoge la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
procesamiento UNG | 37℃: 2 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
【Interpretación de los resultados】
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM y HEX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM y HEX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal |
- | + | |
Ácido nucleico VP72 ASFV positivo | + | - |
Ácido nucleico positivo para VP72 e I177L ASFV | + | + |
Ácido nucleico VP72 e I177L ASFV negativo | - | - |
*Nota:
(1) Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se puede determinar como '+'.Si no hay curva de amplificación, se puede determinar como '-'.Cuando 36 < valor Ct <40, las muestras se deben considerar como resultados dudosos y se debe repetir el análisis para verificar su conformación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810
Kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina africana (VP72/I177L)
【Nombre del producto】Kit de detección de PCR en tiempo real para el virus de la peste porcina africana (VP72/I177L)
【Paquete】50 kits/caja
【Indicación】El kit de detección del virus de la peste porcina africana es aplicable para detectar el ADN del subtipo VP72/I177L del virus de la peste porcina africana en saliva, sangre, tejido y muestras ambientales de cerdo.Los resultados de las pruebas son solo para fines de investigación y no para diagnóstico clínico.
【Principales componentes y contenido】
Nombre | Especificación | Cantidad |
1000µl/Tubo | 1 | |
Control positivo del virus de la peste porcina africana (VP72/I177L) | 250µl/Tubo | 1 |
Control negativo | 250µl/Tubo | 1 |
【Almacenamiento y vida útil】
Almacenado a -20 ± 5 ℃, congelación y descongelación repetidas ≤ 3 veces, la vida útil es de 12 meses.
【Solicitud】ABI QuantStudio 5, CFX Opus 96, LightCycler 480, Gentier 96E/96R, LineGene 9600 Plus y otros instrumentos de PCR en tiempo real.
【Método de prueba】
1. Extracción de ácido nucleico
El kit de extracción de ADN comercializado se puede realizar para la extracción de ácido nucleico, siga las instrucciones del kit.
2. amplificación por PCR
2.1 Calcule el número de muestras de prueba, tome n+2 tubos de reacción de PCR y agregue 20 µl de solución de reacción a cada tubo.
2.2 Agregue 5 µl de ácido nucleico de control negativo, control positivo y muestras en los tubos de reacción PRC anteriores respectivamente, centrifugue a 8000 rpm durante varios segundos y colóquelos en el PCR en tiempo real...
2.3 Las condiciones de reacción se establecen de la siguiente manera:
Parámetros relevantes del amplificador | |||
Sistema | Volumen total: 25 µl | ||
Colección de señales | ASFV (VP72/I177L) Señal fluorescente | I177L-HEXchannel recoge la señal de fluorescencia | |
El canal VP72-FAM recoge la señal de fluorescencia | |||
Condiciones de reacción de PCR | Escenario | Condition | Número de ciclo |
procesamiento UNG | 37℃: 2 minutos | 1 | |
Predegeneración | 95 ℃: 30 segundos | 1 | |
PCR | 95 ℃: 10 segundos |
40 | |
60 ℃: 30 segundos (Establecido para recolectar señal fluorescente al final de esta etapa) |
【Interpretación de los resultados】
1. Determinación de la eficacia del kit de prueba:
(1) Control positivo: valor Ct de los canales FAM y HEX ≤ 32, curva de amplificación con evidente fase exponencial.
(2) Control negativo: los canales FAM y HEX no tienen curva de amplificación, o la curva de amplificación es recta o levemente oblicua.
2. Determinación de los resultados:
Juicio de resultado | canal FAM | canal hexadecimal |
- | + | |
Ácido nucleico VP72 ASFV positivo | + | - |
Ácido nucleico positivo para VP72 e I177L ASFV | + | + |
Ácido nucleico VP72 e I177L ASFV negativo | - | - |
*Nota:
(1) Si hay una curva de amplificación de crecimiento exponencial y un valor de Ct ≤ 36, se puede determinar como '+'.Si no hay curva de amplificación, se puede determinar como '-'.Cuando 36 < valor Ct <40, las muestras se deben considerar como resultados dudosos y se debe repetir el análisis para verificar su conformación.
【Precauciones】
1. La gestión del laboratorio se ajustará estrictamente a las especificaciones de gestión del laboratorio de amplificación génica por PCR.El personal del laboratorio debe estar capacitado profesionalmente.El proceso de experimentación se llevará a cabo estrictamente en diferentes áreas (área de preparación de reactivos, área de preparación de muestras, área de amplificación y análisis de productos).Todos los consumibles serán desechables después de la esterilización.Los aparatos, equipos y suministros especiales en cada etapa de la operación del experimento no se deben usar de forma cruzada.
2. Prepare el gabinete de seguridad biológica para la etapa de preparación de muestras y reactivos.La bata de laboratorio, los guantes desechables y la pipeta se llevarán a cabo durante el experimento.
3. Se evitará en la medida de lo posible la congelación y descongelación repetidas de los reactivos.Antes de su uso, los reactivos deben descongelarse completamente y centrifugarse a 8000 rpm durante varios segundos.
4. Coloque la pipeta utilizada en el área de preparación de muestras en el recipiente que contiene desinfectante y deséchela con los desechos después de la esterilización.
5. Después del experimento, la mesa de trabajo y la pipeta se trataron con hipoclorito al 10 % o alcohol al 75 % o lámpara ultravioleta.
【Fabricar】
Nombre: Tecnología Co., Ltd del gen de Shandong Xinda
Una subsidiaria de Shandong Sinder Technology Co., Ltd
DIRECCIÓN: Edificio B2, Parque Industrial Bandaohuigu, Shungeng Road, Ciudad de Zhucheng, Provincia de Shandong
Código Postal: 262233
Teléfono: +86 - 0532 5882 0810